Etude thermodynamique de l'initiation de la traduction et de l'élongation chez Escherichia coli
Langue Français
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Auteur : Meyer, Benoît
Date de soutenance : 26-09-2016

Directeur(s) de thèse : Ennifar, Éric - Dumas, Philippe

Président : Mechulam, Yves
Rapporteur(s) : Mechulam, Yves - Gillet, Reynald
Membre(s) du jury : Ennifar, Éric - Dumas, Philippe - Mechulam, Yves - Gillet, Reynald - Yusupova, Gulnara - Innis, Axel

Établissement de soutenance : Strasbourg
Laboratoire : Architecture et réactivité de l'ARN (Strasbourg ; 1992-....)
École doctorale : École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
 
Discipline : Biophysique et biologie structurale
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie

Mots-clés libres : Escherichia coli, Ribosome, Thermodynamique, ITC, Complexe d’initiation 30S
Mots-clés :
  • Élongation (biologie moléculaire)
  • Traduction génétique
  • Ribosomes
  • Escherichia coli
Résumé : La traduction est un processus itératif réalisé par le ribosome. Chez Escherichia coli, le ribosome est composé d’une grande sous-unité 50S et d’une petite sous-unité 30S (S correspondant au coefficient de sédimentation). La traduction débute par la mise en place d’une interaction entre le codon d’initiation de l’ARNm et l’anticodon de l’ARNt initiateur. Cette interaction, finement régulée par les facteurs d’initiations IF1, IF2 et IF3, conduit à la formation du complexe d’initiation 30S (30SIC). Par titration calorimétrique isotherme (ITC), nous avons disséqué la thermodynamique de l’ensemble des voies possibles de formation du 30SIC. Sur la base des affinités mesurées, il a été possible d’en déduire un ordre d’assemblage préférentiel. Par cryo-microscopie électronique, nous avons ensuite essayé d’obtenir la structure de ce complexe à haute résolution. La fixation du 50S représente la dernière étape de l’initiation. Par ITC, nous avons cherché à en déterminer les paramètres thermodynamiques, puis nous avons poursuivi avec l’élongation en commençant par étudier l’incorporation d’un aminoacyl-ARNt. Enfin, la réalisation d’une étude comparative par ITC de trois antibiotiques capables de se fixer au tunnel de sortie du peptide, nous a permis d’identifier les forces moléculaires mises en jeu lors de leur interaction avec le ribosome.
 
Type de contenu : Text
Format : PDF
 
Entrepôt d'origine : STAR : dépôt national des thèses électroniques françaises
Identifiant : 2016STRAJ060
Type de ressource : Thèse