Développement de nouveaux couplages combinant la chromatographie liquide non-dénaturante à la spectrométrie de masse native pour la caractérisation de protéines thérapeutiques
Langue Anglais
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Modalités de diffusion de la thèse :
  • Thèse confidentielle jusqu'au 01/01/2021.
  • Thèse soumise à l'embargo de l'auteur : embargo illimité (communication intranet).
 
Auteur : Ehkirch, Anthony
Date de soutenance : 22-11-2019

Directeur(s) de thèse : Cianférani-Sanglier, Sarah

Président : Guillarme, Davy
Rapporteur(s) : Sobott, Frank - Vilaseca, Marta
Membre(s) du jury : Cianférani-Sanglier, Sarah - Guillarme, Davy - Sobott, Frank - Vilaseca, Marta - Bitsch, Francis

Établissement de soutenance : Strasbourg
Laboratoire : Institut pluridisciplinaire Hubert Curien (Strasbourg ; 2006-....)
École doctorale : École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....)
 
Discipline : Chimie analytique
Classification : Chimie, minéralogie, cristallographie

Mots-clés libres : Spectrométrie de masse native, Chromatographie liquide non-dénaturante, Anticorps monoclonaux thérapeutiques
Mots-clés :
  • Anticorps monoclonaux - Propriétés physico-chimiques
  • Chromatographie en phase liquide
  • Spectrométrie de masse
Résumé : Ce travail de thèse est focalisé sur le développement de méthodes combinant la chromatographie liquide non dénaturante à la spectrométrie de masse native (MS native) pour la caractérisation de protéines thérapeutiques en particulier des anticorps monoclonaux (mAbs). Les techniques de chromatographies liquides non-dénaturantes (ndLC) sont utilisées avec des phases mobiles comportant des sels non-volatils et donc incompatibles avec la MS native. Dans ce contexte, les développements de nouveaux couplages impliquant la chromatographie d’exclusion stérique (SEC), la chromatographie à échange cationique (CEX), la chromatographie d’interaction hydrophobe (HIC) et la MS native ont été réalisés. Le couplage de la SEC à la MS native a permis d’identifier et de quantifier les variants de tailles de mAbs. Le couplage CEX-MS native permet l’identification et la quantification des variants de charges de mAbs. Enfin, le couplage direct de la HIC à la MS native a permis de caractériser les anticorps immunoconjugués à cystéine. L’ensemble des développements méthodologiques réalisés au cours de ce travail de thèse ont permis de démontrer le bénéfice des couplages ndLC-MS native.
 
Type de contenu : Text
Format : PDF
 
Entrepôt d'origine : STAR : dépôt national des thèses électroniques françaises
Identifiant : 2019STRAF048
Type de ressource : Thèse