Conception et synthèse de conjugués de type anticorps-particules d'or pour un marquage à haute résolution de cibles moléculaires du vivant
Langue Anglais
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Modalités de diffusion de la thèse :
  • Thèse confidentielle jusqu'au 09/12/2021.
  • Thèse soumise à l'embargo de l'auteur jusqu'au 09/12/2021 (communication intranet).
 
Auteur : Groysbeck, Nadja
Date de soutenance : 09-12-2020

Directeur(s) de thèse : Zuber, Guy

Président : Klymchenko, Andrey
Rapporteur(s) : Braeckmans, Kévin - Le Guevel, Xavier
Membre(s) du jury : Pichon, Chantal

Établissement de soutenance : Strasbourg
Laboratoire : Biotechnologie et signalisation cellulaire (Strasbourg ; 2011-....)
École doctorale : École doctorale des Sciences chimiques (Strasbourg ; 1995-....)
 
Discipline : Chimie biologie
Classification : Chimie, minéralogie, cristallographie, Sciences de la vie, biologie, biochimie

Mots-clés libres : Nanoparticule d'or, Conjugaison sélective, Cryo-microscopie électronique, Anticorps, Cellule vivantes
Mots-clés :
  • Biochimie
  • Nanoparticules d'or
  • Anticorps
  • Cellules
Résumé : L'imagerie par microscopie électronique (ME) des cellules nécessite des agents de contraste, car les cellules sont constituées d'éléments de faible numéro atomique. Des nanoparticules d'or (AuNPs) de 5 à 15 nm se sont avérées utiles à cet effet et fonctionnalisées avec des anticorps, elles permettent le marquage de protéines cellulaires. En raison d’une augmentation de la résolution d'image en ME et l'avènement de la cryo-ME permettant l'imagerie de cellules dans des conditions proches du natif, les sondes classiques d'anticorps-AuNP (ca. 25 nm de diamètre, non compatible avec les conditions cryogéniques) semblent obsolètes. Pour surmonter ces limitations, nous avons développé de nouvelles sondes basées sur des AuNPs de 1.4 à 2.4 nm qui ont été conjugués de manière sélective à des anticorps et des nanobodies. Les sondes ont été caractérisées pour leur capacité de ciblage et certaines des sondes se sont avérées se lier spécifiquement à leurs cibles à l'intérieur de cellules vivantes. Ces résultats jettent les bases pour localiser des protéines cellulaires à haute résolution dans des conditions quasi-natives par cryo-ME.
 
Type de contenu : Text
Format : PDF
 
Entrepôt d'origine : STAR : dépôt national des thèses électroniques françaises
Identifiant : 2020STRAF055
Type de ressource : Thèse