De l’analyse fonctionnelle d’ARNt nucléotidyltransférases vers leur caractérisation par cristallographie sérielle sous rayonnement X
Langue Anglais
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Auteur : Rollet, Kévin
Date de soutenance : 17-03-2022

Directeur(s) de thèse : Sauter, Claude - Mörl, Mario

Président : Schultz, Patrick
Rapporteur(s) : Ledu, Marie-Hélène - Schneider, André
Membre(s) du jury : Coin, Irene

Établissement de soutenance : Strasbourg - Universität Leipzig
Laboratoire : Architecture et réactivité de l'ARN (Strasbourg ; 1992-....)
École doctorale : École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
 
Discipline : Biophysique et biologie structurale
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie, Chimie, minéralogie, cristallographie

Mots-clés libres : Cristallographie aux rayons X, Cristallographie sérielle, ARNt nucléotidyltransférase, Cristallisation, Macromolécules biologiques, Xtal Controller, Organisme psychrophile
Mots-clés :
  • Radiocristallographie
  • ARN de transfert
  • Complexes multienzymatiques - Structure
Résumé : La dernière décennie marque d'importantes évolutions dans le domaine de la biologie structurale, en particulier dans la cristallographie sérielle aux rayons X résolue en temps. L’objectif de cette thèse en cotutelle entre les universités de Strasbourg et de Leipzig, était d’appliquer cette approche à la caractérisation fonctionnelle et structurale de trois CCA-adding enzymes. En combinant résultats biochimiques et méthodes de cristallisation avancées, nous avons pu : 1) déterminer l'affinité de liaison de nos candidats à divers substrats ainsi que les propriétés cinétiques des réactions catalysées , 2) obtenir des conditions reproductibles de production de cristaux pour les analyses standard et SSX,3) suivre les événements de nucléation et contrôler la cristallisation de certaines enzymes grâce au Xtal Controller, 4) acquérir des données sérielles in situ à température ambiante en puce microfluidique, 5) résoudre la structure d’une cible dans sa forme apo ou en complexe avec un ligand.
 
Type de contenu : Text
Format : PDF
 
Entrepôt d'origine : STAR : dépôt national des thèses électroniques françaises
Identifiant : 2022STRAJ014
Type de ressource : Thèse