Exploitation des voies d'adressage mitochondrial d'ARN à des fins thérapeutiques
Langue Français
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Auteur : Loutre, Romuald
Date de soutenance : 11-12-2017

Directeur(s) de thèse : Entelis, Nina

Président : Dietrich, André
Rapporteur(s) : Lombès, Anne - Mireau, Hakim

Établissement de soutenance : Strasbourg
Laboratoire : Génétique moléculaire, génomique et microbiologie (Strasbourg)
École doctorale : École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
 
Discipline : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie

Mots-clés libres : Mitochondrie, ADN mitochondrial, Hétéroplasmie, Import mitochondrial, CRISPR/Cas9
Mots-clés :
  • Organites - Métabolisme -- Génétique
  • ADN mitochondrial
  • ADN -- Réplication
  • Génomique
Résumé : Les mitochondries sont des organites possédant leur propre génome qui peut être l’objet de mutations, souvent associées à de graves maladies neuromusculaires. La plupart des mutations de l’ADN mitochondrial (ADNmt) sont hétéroplasmiques, ce qui signifie que les molécules mutantes et sauvages coexistent dans une même cellule. Ce projet de thèse a été consacré au développement de deux stratégies qui visent à diminuer la proportion d’ADNmt mutant en utilisant les voies d’import mitochondrial d’ARN. Nous avons tout d’abord utilisé une stratégie anti-réplicative qui vise à altérer la réplication de l’ADNmt mutant. Nous démontrons que l’expression d’ARNr 5S contenant des séquences anti-réplicatives permet de diminuer le taux d’hétéroplasmie dans des conditions sélectives de culture. Puis, nous avons développé un système CRISPR/Cas9 mitochondrial pour cliver l’ADNmt. La nucléase Cas9 et des ARNsg modifiés peuvent être redirigés vers les mitochondries. L’introduction de deux ARNsg ciblant des régions distinctes de l’ADNmt provoque des déplétions de ce génome, ce qui pourrait constituer la première indication d’un effet de CRISPR/Cas9 sur l’ADNmt.
 
Type de contenu : Text
Format : PDF
 
Entrepôt d'origine : STAR : dépôt national des thèses électroniques françaises
Identifiant : 2017STRAJ107
Type de ressource : Thèse